ELISA testi: prensip nedir?

ELISA testi: prensip nedir?

Tanım: ELISA testi nedir?

Bağlantılı enzim immünoabsorpsiyon testi tekniği – İngilizce Enzim Bağlantılı İmmüno Testinde – veya ELISA testi, biyolojik bir numunedeki moleküllerin saptanmasına veya test edilmesine izin veren bir immünolojik testtir. 1971'de Stockholm Üniversitesi'nde iki İsveçli bilim adamı Peter Perlmann ve Eva Engvall tarafından kavramsallaştırıldı ve geliştirildi.

ELISA yöntemiyle tahlil edilen moleküller genellikle proteinlerdir. Ve numune türleri arasında sıvı biyolojik materyaller - plazma, serum, idrar, ter -, hücre kültürü ortamı veya rekombinant protein - genetik materyali genetik rekombinasyon ile değiştirilmiş bir hücre tarafından üretilen - solüsyona saflaştırılmış protein bulunur.

ELISA testi esas olarak immünolojide bir numunedeki proteinlerin, antikorların veya antijenlerin varlığını tespit etmek ve/veya ölçmek için kullanılır. Bu serolojik test, özellikle viral kontaminasyona yanıt olarak vücut tarafından üretilen antikorları tespit eder.

Bulaşıcı hastalıklar için ELISA testinin prensibi

Bulaşıcı hastalıkların teşhisi için antikorların kullanımı, spesifik ve hızlı bir yöntemi temsil eder. ELISA tekniği, biyolojik bir örnekten, bir antijen - canlı organizma tarafından yabancı olarak kabul edilen bir vücut - ve bir antikor arasındaki reaksiyonların, bir enzim belirteci tarafından üretilen bir renk reaksiyonu kullanılarak görselleştirilmesini sağlayan immüno-enzimatik bir tekniktir. genellikle alkalin fosfataz ve peroksidaz – daha önce antikora eklenmiş. Renk reaksiyonu, izole edilen bakterinin tanımını veya istenen virüsün varlığını doğrular ve rengin yoğunluğu, verilen numunedeki antijen veya antikor miktarının bir göstergesini verir.

Farklı ELISA testleri türleri

Dört ana ELISA testi türü vardır:

  • ELISA direkt, antikorları tespit etmeyi veya ölçmeyi mümkün kılar. Yalnızca birincil bir antikor kullanır;
  • ELISA dolaylı, en yaygın olarak kullanılan, aynı zamanda antikorları tespit etmeyi veya test etmeyi de mümkün kılar. Doğrudan ELISA'dan daha iyi hassasiyet sağlayan ikincil bir antikor kullanır;
  • ELISA yarışmada, antijenlerin dozajına izin verir. Bağlar için rekabetle üretilir, enzim kullanmaz;
  • ELISA «sandviçte», antijenlerin dozajına izin verir. Bu teknik araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır.

ELISA testinin kullanılması

ELISA testi aşağıdakiler için kullanılır:

  • Enfeksiyöz hastalıkların teşhisi için serolojide antikorları bulun ve ölçün: viroloji, parazitoloji, bakteriyoloji, vb.;
  • Düşük konsantrasyonlardaki proteinleri dozlayın: belirli plazma proteinlerinin (immünoglobulin E (IgE), ferritin, protein hormonları, vb.), tümör belirteçlerinin, vb. spesifik dozajları;
  • Küçük molekülleri dozlayın: steroid hormonları, tiroid hormonları, ilaçlar…

En yaygın vakalar: Covid-19, Dang humması, HIV, Lyme, alerji, hamilelik

ELISA testi özellikle birçok bulaşıcı hastalığı teşhis etmek için kullanılır:

Cinsel yolla bulaşan hastalıklar (STD'ler)

Hepatit, frengi, klamidya ve HIV dahil. Sağlık otoriteleri tarafından tavsiye edilen ana AIDS tarama testidir: enfeksiyondan altı hafta sonra anti-HIV antikorlarının ve p24 antijeninin varlığını gösterir.

Bölgesel veya endemik hastalıklar

Sarı humma, Marburg virüsü hastalığı (MVM), Ladengue, Lyme hastalığı, Chikungunya, Rift Valley humması, Ebola, Lassa ateşi vb.

Covid-19

Semptomların başlamasından 2 ila 3 hafta sonra gerçekleştirilecek olan ELISA testi, bir saatten daha kısa bir sürede anti-SARS-CoV-2 antikorlarının varlığını belirlemeyi mümkün kılar.

Doğum öncesi enfeksiyonlara neden olan viral patojenler

Örneğin toksoplazmoz, kızamıkçık, sitomegalovirüs, herpes simpleks.

Diğer durumlarda

Ama aynı zamanda algılamada uygulamalar bulmuştur:

  • gebelikler;
  • Otoimmün hastalıklar;
  • Gıda alerjenleri: Toplam immünoglobulin E'nin (IgE) kantitatif tespiti, alerjilerin değerlendirilmesine ve tedavisine yardımcı olur;
  • Hormonal bozukluklar;
  • Tümör belirteçleri;
  • Bitki virüsleri;
  • Ve daha fazlası

Covid-19 testinin güvenilirliği

Anti-SARS-CoV-2 antikorlarının saptanmasının bir parçası olarak, Institut Pasteur, CNRS, Inserm ve Paris Üniversitesi tarafından Ağustos 2020'de gerçekleştirilen bir pilot çalışma, ELISA testinin güvenilirliğini doğrulamaktadır: her iki ELISA testi de test edilmiş kullanım hedef antijenler olarak SARS-CoV-2'nin tüm N proteini (ELISA N) veya virüs sivri ucunun (S) hücre dışı alanı. Bu teknik, %90'lik çok düşük bir yanlış pozitif oranıyla, vakaların %1'ından fazlasında antikorları tanımlamayı mümkün kılacaktır.

ELISA testinin fiyatı ve geri ödenmesi

Tıbbi reçete ile analiz laboratuvarlarında yapılan Elisa testleri yaklaşık 10 Euro'ya mal oluyor ve Sağlık Sigortası tarafından %100 oranında geri ödeniyor.

Ücretsiz bilgi, tarama ve tanı merkezlerinde (CeGIDD) gerçekleştirilen çalışmalar HIV ve SARS-CoV-2 için ücretsiz olabilir.

Yorum bırak